구충제 (알벤다졸, albendazole)로 암 (cancer) 치료의 현실.

최근 구충제 (알벤다졸, albendazole)로 암을 치료 했다는 소식에 연구가 많이 진행 되고 있다.

이 번에는 그에 대한 연구 자료를 인용하여 궁금증을 해소해 보도록 하겠다.

 

 

암은 새로운 질병이 아니며 지난 몇 년 이후 너무나 많은 사람들이 암으로 고통 받고 사망하였다. 암은 심혈관 질환 다음으로 전 세계 사망률의 두 번째 주요 원인이다. 게다가 암 환자도 늘고 있다. 따라서, 이 병은 모든 인간 사회에 절대적으로 심각한 위협이다. 불행히도 암은 장기, 종양, 세포의 측면에서 매우 다양한 질병이다. 이러한 다양성은 암의 특정 검출에 직면하는 가장 중요한 도전이며, 그 결과 그 치료의 구체적이고 적절한 치료에 심각한 영향을 미친다.

 

암세포는 세포 증식의 정상적인 과정을 따르지 않는다; 비정상적으로 분열되고 증식하며 건강한 기관과 조직을 파괴한다. 그러나 이 현상의 정확한 원인은 밝혀지지 않고 있으나 유전적, 바이러스, 독성 화학물질 등 많은 요인들이 관련되어 있다. 암은 proto-oncogenes이 활성화되고 종양 억제기 유전자(TSG)가 활성화되지 않아 제어되지 않은 세포 주기 및 불완전한 세포 분열의 결과로 정상적으로 성장한다.

 

수술, 유전자요법, 호르몬요법, 전파요법, 혈관신생 억제법, 화학요법 등 암을 치료하는 전략이 많다. 최근 몇 년 동안, 화학요법 과정에 적합한 후보를 발견하기 위해 다수의 자연 및 합성 물질이 개발되고 평가되었다.

 

이전의 연구들은 알벤다졸(albendazole)이 안전하고 효과적인 기생충 치료제라는 것을 보여주었다. 흥미롭게도, 이 화합물은 간암의 간세포에서 anti-tumor 활동을 하고 있다는 것이 밝혀졌다. 최근 몇 년 동안, 알벤다졸(albendazole)의 많은 새로운 anti-tumor 측면이 발견되었다. 이러한 발견은 알벤다졸(albendazole)이 국소적 효과보다는 체계적인 anti-tumor을 가지고 있다는 것을 보여주었다. 일부 연구에서는, Paclitaxel과 같은 알벤다졸(albendazole)이 암세포에 독성이 있는 것으로 여겨진다. 알벤다졸(albendazole)은 인간의 장에서 유래된 복막 종양의 세포 성장을 억제할 수 있는 강력한 잠재력을 가지고 있다는 것이 입증되었다. 알벤다졸(albendazole)의 이 anti-tumor 활동은 세포 주기의 G2/M 단계를 통해 매개된다고 가정한다.

 

이전 연구에 따르면 알벤다졸(albendazole)(500mM)로 72시간 동안 폐암 세포(SCLC)를 치료한 결과 종양 성장 억제가 30.3%~5.9%로 나타났다. 알벤다졸(albendazole) 농도가 500 mM보다 높은 치료는 세포 성장 방지 효과가 없었다. 그 결과 알벤다졸(albendazole)(500mM)로 종양세포를 치료하면 세포순환의 G2/M단계(12개)에서 세포수가 감소하는 것으로 나타났다.

 

해당 연구에서는 배양된 두 개의 유방 세포 라인(MCF7 및 MDA)과 멜라노마 세포 라인(B16F10)에 대해 서로 다른 알벤다졸(albendazole) 농도의 세포독성 효과를 평가했다.

 

 

 

이에 대한 방법은 아래와 같다.

​

3.1. 약물

알벤다졸(albendazole)(Sigma Aldrich, 미국)는 DMSO에서 0.01% V/V의 총 농도로 제조되었으며, 이후 각 셀 라인의 특정 매체 문화와 혼합되었다.

 

3.2. 세포와 세포 배양

유방암 MDA-MB-231(Endopplasmic Reticulum 음극)과 MCF-7의 두 개의 세포선과 흑색종 세포선(B16F10)이 파스퇴르 연구소(이란, 테헤란)에 위치한 이란 국립 세포은행에서 구입되었다. 모든 세포 배양 성분은 미국 지브코사로부터 얻어졌으며, 모든 세포 라인은 각각 1% 항생제(페니실린 100단위/mL, 스트렙토마이신 100단위/mL)를 함유한 PBS(인산 완충 식염수)와 DMEM(Dulbecco's Modified Eagle's Medium)에서 배양되었다. 또한, MTT 시험을 시작하기 전에 세 구절까지 매체를 FBS와 섞었다. 세포는 각각의 우물에서 5 × 104 cell/mL로 배양되었다. 세포는 섭씨 37도, 이산화탄소 5%로 배양되었다.

 

3.3. MTT 시험

세포(5 × 104 cell/mL)는 96웰 플레이트에서 배양하여 37°C에서 CO2 5%로 24시간 배양하였다. 이 시간 이후 두 개의 유방암 세포 라인(0.1, 1, 10, 100 μM)과 흑색종 세포 라인(1, 10, 100 μM)에 대한 ABZ의 상이한 선량이 조사되었다. 또한, 180 μL 셀 서스펜션과 셀 서스펜션만을 사용한 20 μL DMSO 혼합은 각각 음극과 양의 제어로 사용되었다. 그 후 마이크로 플레이트는 같은 조건에서 다시 24시간 동안 배양되었다. 다음 단계에서 상부 액체를 제거한 후 20μL MTT 솔루션을 추가했다.

 

각 셀 라인의 웰에 대해 200μL의 특정 배지. 그 후 세 시간 더 배양되었다. 마침내, 상등생물을 제거한 후, 150 μL DMSO를 불용성 청색 포마얀을 해결하기 위한 웰에 추가했다. 각 우물의 대사활동은 색도법과 MTT 염료를 이용하여 평가하였다. 마이크로 플레이트의 내용은 570 nm에 ELISA에 의해 결정되었다. 서로 다른 셀 라인과 MTT 분석에 대한 알벤다졸(albendazole)의 각 농도는 세 번 반복되었다. 세포의 생존가능성의 퍼센트는 공식 1에 의해 결정되었고 대조군 그룹과 비교되었다.

 

3.4. 통계분석

t - test는 데이터를 분석하여 MTT 결과를 평가하였다. P 값 ≤ 0.05 및 P 값 ≤ 0.001은 통계적으로 유의한 값으로 간주되었다. 분산 분석은 데이터를 분석하기 위해 사용되었다. 평균 비교는 SPSS(버전 18.0) 통계 소프트웨어에서 Dunnett의 테스트에 의해 수행되었다.

 

상기와 같은 연구 분석은 아래와 같은 결론에 도달 할 수 있다.

유방암 세포 라인, MDA-MB-231 및 MCF7, 그리고 흑색종 세포 라인(1, 10, 100 μM)에서 각각 농도(0.1, 1, 10, 100 μM)가 다른 ABZ의 독성 효과는 24시간 후 MTT 테스트를 통해 구현되었다(그림 1, 2, 3). MTT 시험은 각 사례에 대해 3회 반복되었고, 그 결과 통계는 평균 분산을 사용하여 평가되었다. MDA-MB-231, MCF7 및 흑색종 세포 라인의 경우 각각 0.1~100μM, 10~100μM의 독성 효과가 24시간 후에 나타났다.

 

결과는 알벤다졸(albendazole)(0.1, 1, 10 및 100μM)의 다른 선량이 MCF7 세포의 생존성을 현저히 감소시킨다는 것을 보여주었다. 알벤다졸(albendazole), 0.1, 1, 10, 100 μM의 다양한 농도로 감소하는 비율은 14.72%, 31.54%, 37.76%, 44.17%로 상승하는 농도에 대한 알벤다졸(albendazole)의 독성 증가 효과를 나타냈다(P값 ≤ 0.001). 그러나 MDA-MD231 셀 라인 셀에 대한 알벤다졸(albendazole)의 상당한 독성 영향은 약 27.21%(P 값 ≤ 0.05)의 생존력 감소를 가진 농도 100μM에서만 확인되었다. 또한 모든 알벤다졸(albendazole) 농도에서 B16F10 셀 라인에 미치는 이 영향은 유의하였으며, 이에 따라 알벤다졸(albendazole) 농도 100, 10, 1μM에 대한 셀 생존성이 34.33%, 27% 감소하여 2차 농도(P값 ≤ 0.001)보다 1, 3차 농도(P값 ≤ 0.001)에서 더 높은 영향을 주었다.

 

해당 연구에서는 알벤다졸(albendazole)가 유방암 세포 라인, MDA-MB-231, MCF7, 흑색종 세포 라인 B16F10에 미치는 세포독성 효과가 처음으로 평가되었다. 알벤다졸(albendazole)의 anti-tumor 효과에 관한 이전의 연구와 관련하여, 두 개의 유방암 세포 라인(0.1, 1, 10 및 100 μM)과 흑색종 세포 라인(1, 10 및 100 μM)에 대해 24시간 치료 후 선택된 선량을 조사하였다.

 

Benzimidazole의 파생상품인 알벤다졸(albendazole)는 인간과 동물의 벌레에 대한 광범위한 효과를 가지고 있다. 동물 임상 실험과 인간 임상 실험 모두에서 알벤다졸(albendazole)의 anti-tumor 효과가 보고되었다. 알벤다졸(albendazole)은 다른 대사물들에 비해 훨씬 많은 anti-tumor 효과를 가지고 있는 것으로 나타나는데, 아마도 그 보다 많은 지질학적 특성 때문일 것이다.

 

본 연구의 결과는 알벤다졸(albendazole)가 MCF7, B16F10 및 MDA-MD231 세포의 생존성을 현저히 감소시켰다는 것을 보여준다. 또한 알벤다졸(albendazole) 농도의 상승으로 알벤다졸(albendazole)의 독성 효과가 증가한다.

 

장암과 같은 많은 암에 대한 알벤다졸(albendazole)의 영향은 이미 보고되었다. Pourgholami et al.에 의해 수행된 연구는 알벤다졸(albendazole)가 체외와 체외에서 암 간세포의 성장을 강하게 억제한다는 것을 보여주었다. 그들의 결과는 알벤다졸(albendazole) 억제 효과가 100과 1000nM 농도에서 뚜렷하게 나타나므로 대조군에 비해 체외 성장 셀이 거의 80% 감소하여 현재의 연구와 유사한 결과를 설명하였다.

 

암이 진행된 환자에서 알벤다졸(albendazole)의 최대 경구 투여량을 결정하는 것을 목표로 한 임상 연구에서 알벤다졸(albendazole)는 상당히 많이 투약이 가능 한 것으로 나타났다. 골수암 세포를 억제하기 위한 알벤다졸(albendazole)의 최대 견딜 수 있는 선량은 하루 400.2mg으로, 검사 대상 환자 24명 중 4명의 종양 표식기 기준치가 최소 50% 감소하는 결과를 낳았다.

 

전 세계의 알벤다졸(albendazole)에 대한 많은 임상연구들은 그 연구자가 알벤다졸(albendazole)에 많은 혜택을 주도록 설득했다. MCF7과 B16F10 유방암 세포 라인에서 모두 알벤다졸(albendazole)가 낮은 수준에서도 anti-tumor 활성을 가지고 있음을 확인함에 따라 다양한 악성종양 치료에 있어 가장 중요한 접근법으로서 복합요법의 효능을 높이기 위해 약물 내성 억제가 구현되었다. 이 고려사항에서 암세포에 대한 2-메톡시스트라디올(2ME)과 함께 저선량에서 알벤다졸(albendazole)의 anti-tumor 효과가 조사되었다. 그들은 ABZ의 선량 5와 10 μM을 사용했으며, 2-메톡시스트라디올(2ME)과 함께 알벤다졸(albendazole)의 저선량이 시너지 anti-tumor 효과를 가지고 있다고 보고했다. 더욱이, Paclietaxel 내성 세포 라인은 알벤다졸(albendazole)에 민감하여, 아마도 튜불린 형성의 붕괴를 통해 알벤다졸(albendazole)의 작용 메커니즘을 나타낸 것으로 추측된다.

 

현재, 종양 세포를 치료에 민감하게 만들 수 있는 잠재력을 가진 새로운 anti-tumor를 발견하기 위한 연구가 엄청나게 증가하고 있다. 화학요법 약물에 대한 암세포의 저항은 약물에 대한 이러한 세포의 반응 수준을 감소시키고 그 결과 치료 노력이 실패하게 된다. 따라서 새롭고 효율적인 항혈관신생 및 항투모제 개발을 위한 조사가 더 필요하다. 일반적인 치료법에 대한 종양의 저항력 증가와 관련하여, 성공적인 암 치료를 위한 새로운 항-투명제를 발견하는 것은 중요하다. 또한, 알벤다졸(albendazole)의 수많은 anti-tumor 메커니즘과 관련하여, 다른 항-항암제들과 함께 실질적으로 사용될 수 있다.

 

해당 연구 결과는 알벤다졸(albendazole)가 세포독성 효과를 가지고 있다는 이전의 연구들에 의한 관측에 따른 것이다. MCDA-MB231 셀 라인에 의한 알벤다졸(albendazole) 치료는 4가지 알벤다졸(albendazole) 농도를 모두 사용한 치료로 세포의 생존성이 현저히 저하되는 결과를 가져온 반면, MDA-MB231 셀 라인에 의한 알벤다졸(albendazole) 치료에 대한 이러한 반응은 1개의 알벤다졸(albendazole) 농도에서만 유의미했다. 또한 B16F10 세포의 생존성은 세 가지 시험된 알벤다졸(albendazole) 농도에 의해 상당히 감소하였다. 결론적으로 알벤다졸(albendazole)가 유방암과 흑색종 세포에 미치는 세포독성 효과에 따라 다른 항암제들과 함께 유망한 보조제로 활용할 수 있다.

 

그러나, 해당 연구는 임상을 전제로 한 것이 아니기 떄문에, 복용자의 주의를 요망 한다.